KOD FX Neo
实验例8: 小鼠指甲直接PCR


 


1Mouse TATA box binding protein (TBP) 0.5 kb
2Mouse transferrin receptor (Tfr) 1.5 kb
3Mouse membrane glycoprotein (Thy-1) 2.6 kb


【样品】小鼠指甲


取样方法



【方法】



【基因名・目的片段】
・Mouse TATA box binding protein (TBP) 0.5 kb
・Mouse transferrin receptor (Tfr) 1.5 kb
・Mouse membrane glycoprotein (Thy-1) 2.6 kb


【引物序列】
Mouse TBP F CAGTTGCTACTGCCTGCTGTTGTT
Mouse TBP R GCTAGGATTAAAGACGTGCCACCA
Mouse Tfrc F TGTGGAGGGTCAACGTGGTAGTT
Mouse Tfrc R GTGACATTCTCAGGTGGCAGCTT
Mouse Thy-1 F02CCACAGAATCCAAGTCGGAACTCTTG
Mouse Thy-1 R05GTAGCAGTGGTGGTATTATACATGGTG


【反应条件】
DW                                                 11
2×Buffer  for KOD FX Neo          25
2mM dNTPs                                    10
10 pmol/ml  Primer F                     1.5
10 pmol/ml  Primer R                    1.5
KOD FX                                              1 
                             50 μL

PCR循环】
KOD FXKOD FX Neo
94℃, 2 min.
(98℃, 10 sec., 68℃, 1min./kb) ×35 cycles


其他公司试剂按其说明书推荐的最识条件进行反应。



【评语】
 小鼠指甲(toe)可通过不伤害小鼠的方式简便地获取,是进行基因分型的最适合的材料之一。用KOD FX系列可对小鼠指甲进行高效率的PCR,请务必尝试一下。