THUNDERBIRD® Next qPCR Mix 系列
<实验例1>扩增效率的提高


将每个目的片段的PCR效率的误差限制到最低,可定量长至500bp的片段。



【100bp~500bp的扩增确认】


以人工合成的基因为模板,Forward 引物为共用引物,设计扩增长物为100bp、200bp、300bp、400bp及500bp的Reverse引物。使用这些引物,分别用THUNDERBIRD Next SYBR qPCR Mix及各公司Realtime PCR试剂进行107~101拷贝的扩增,比较各扩增长度的PCR效率。

结果显示,用其他公司的产品时扩增效率低下或不能检测的400bp以上的目的片段,使用本产品检测时也未见扩增效率低下。


*Realtime PCR按各公司推荐条件进行反应。



所谓扩增效率(PCR效率)是指?

使用系列稀释样品作成标准曲线,可根据该标准曲线的斜率(Slope)计算出扩增效率。

例如,标准曲线(Slope)的值为-3.322时,按以下方法进行计算。

E=10(-1/-3.322) – 1 = 1.999-1 =0.999(99.9%)

该值越接近1(100%),PCR效率越高,越接近于每增加1个循环DNA量增加2倍的理想状态。

循环数(Ct值)

 DNA浓度(Log)