性能及性价比优秀的Realtime PCR试剂

高性能Realtime PCR Master Mix Realtime PCR Master Mix系列

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价格表

Realtime PCR Master Mix

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
QPK-101 1ml×5支 RMB 1,500 -20℃ 产品说明书

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
QPK-201 1ml×5支 RMB 1,500 -20℃ 产品说明书

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
QPK-212 1ml×5支 RMB 1,600 -20℃ 产品说明书

用途

Realtime PCR

说明

本产品是在 Taq DNA polymerase 基础上开发的通用性很高的Realtime PCR 用 2×浓度的预混液。可获得重复性良好的结果。

各试剂分别按以下所示进行使用。

产品名

用途

是否有passive reference校正

是否可用于玻璃毛细管

能否用于一步法RT-PCR*

可靠性

Realtime PCR Master Mix

探针法**

☆☆☆

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix

SYBR® Green法

☆☆☆

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-

SYBR® Green法

不可

☆☆☆☆

*逆转录酶「ReverTra Ace®」[Code No. TRT-101]与RNase inhibitor [Code No. SIN-201] 组合,就可以进行one-step PCR。
**可用于TaqMan® probe分析法及Hybridization probe分析法等。
 

特征

●高特异性
为了抑制非特异性反应,本产品采用了抗Taq聚合酶抗体的热启动法。


●适用于各种用途
可用于探针分析法及SYBR® Green I分析法。


●适用于各类仪器
产品中还添加了 Passive Reference,可应用于需要校正的仪器(Applied Biosystems®、StepOnePlusTM等)。
还可用于使用玻璃毛细管类型的检测仪器(Roche Diagnostics公司的LightCycler®等)。


●提高了可靠性 [SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-(QPK-212)]
通过对组分的最优化,抑制了SYBR® Green 分析时引物二聚体等问题的产生,提高了可靠性和重复性。


●使用了高纯度Taq DNA polymerase
PCR的基本性能得到了改善。


 

实验例

1. SYBR® Green 分析体系与其他公司产品的反应性能比较
本例将SYBR® Green 分析体系与其他公司产品的反应性能进行了比较。首先将人的基因组DNA各作10倍梯度稀释(从30ng到3pg的5个梯度),以稀释液为样品进行PCR,扩增β-actin基因。结果显示,使用本产品时,在扩增效率及起峰早晚方面有显著优势。另外,引物二聚体的产生也不明显。

(仪器:使用BioFlux公司的LineGene)


2. 相关性分析的讨论
使用本公司的逆转录试剂盒ReverTra Ace -α-®,以HeLa细胞来源的Total RNA(100ng)为模板,使用random primer合成1st strand cDNA之后,稀释10倍后作为标准品,各作5倍梯度稀释,检测β-actin基因。结果显示,所有浓度都得到了良好的扩增曲线。

(使用Roche公司的LightCyclerTM


3. 与其他公司产品性能的比较【相关性】
啮齿类动物来源的基因组DNA(以10倍稀释系列:10ng、1ng、0.1ng、0.01ng(n=2))为模板,通过相关性分析进行目的基因(约80bp)的检测。结果显示,A公司的试剂产生了非特异性扩增及引物二聚体,但用SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-却得到了良好的扩增。另外,Ct值的间隔也是相等的,可定量扩增区域也非常广。

(仪器:使用BioFlux公司的LineGene)


4. TaqMan® 法的应用
使用本公司的逆转录试剂盒ReverTra Ace -α-®,以HeLa细胞来源的Total RNA(100ng)为模板,使用random primer合成1st strand cDNA之后,稀释10倍后作为标准品,各作5倍梯度稀释,使用Applied Biosystems公司的Pre-Developed TaqMan® Assay Reagents对β-actin进行TaqMan®法检测。结果显示,所有浓度都得到了良好的扩增曲线。没有扩增的曲线是空白对照(蒸馏水)。

(仪器:使用ABI PRISM® 7700)





 
产品内容

【QPK-101,QPK-201】
Master Mix1ml ×5支
(50μl反应200次份、20μl反应500次份)

【QPK-212】
Master Mix1ml ×5支
Plus solution1ml ×1支
(50μl反应200次份、20μl反应500次份)

注意事项

关于PCR相关产品的标签许可事项,请浏览本公司的网站(www.bio-toyobo.cn) [PCR相关产品角]。

基本反应条件

〈SYBR® Green I 法〉
灭菌水Xμl
Master Mix25μl
各Primer10pmoles each~
DNA样品Yμl

Total Volume50μl


Cycle
95℃    60sec.
       ↓
95℃    15sec.
55~65℃    15sec. 40cycles
72℃    45sec.
※退火温度,请根据引物的Tm在55~65℃之间进行调整。
※延伸反应时间,只要扩增长度在200bp左右,设定为45sec就可以。

备注

LightCycler® 是Idaho Technology Inc.的商标。
SYBR® 是Molecular Probes Inc.的注册商标。
TaqMan® 是Roche Molecular Systems Inc.的注册商标。
ABI PRISM® 是Applied Biosystems Inc.的注册商标。


几点建议

FAQ请点击这里


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