高效率cDNA合成试剂盒 ReverTra Ace -α-®

  • NEW ITEM

价格表

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
FSK-101 100次份 RMB 1,950 -20℃ 产品说明书

用途

RT-PCRcDNA合成

说明

本试剂盒使用的逆转录酶ReverTra Ace®属于在高温反应性和反应效率方面进行了提高的改良型M-MLV RTase(RNaseH-),与以往的RTase相比,可以合成更长的cDNA(已确认到可以合成cDNA长度最长可达14kb)。


 

特征

●高效率

使用高效率逆转录酶「ReverTra Ace®」,可以高效率地合成cDNA。

●应用范围广

可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以Specific Primer的各种逆转录情况。

●确证

因含有阳性对照(positive control), 可在确证各步骤的同时推进实验进展。

 

实验例

使用ReverTra Ace -α-®以HeLa Total RNA(1μg)为模板,进行cDNA的合成后,使用各种PCR酶,以β-actin(838bp)为目的片段进行PCR反应cDNA合成反应是在20μl的反应体系中,42℃下反应20min.,接着99℃进行5min的失活处理。然后,向合成的cDNA反应液中加入80μl的PCR溶液,使总体系达100μl,进行PCR反应。

结果显示,所有的酶都确认有扩增,ReverTra Ace -α-®的逆转录产物可适用于各种PCR酶的扩增反应。




 

参考文献

1)Hatta M. et al., Intl. J. Mol. Med., 9: 147-152 (2002)

产品内容

ReverTra Ace®100μl
5×RT Buffer*〔TRT-1B〕400μl
Random Primer〔FSK-301〕100μl
Oligo(dT)20 Primer 〔FSK-201〕100μl
10mM dNTPs〔NTP-301〕200μl
RNase Inhibitor100μl
RNase Free H2O1.2ml


*5×RT Buffer与ReverTra® Ace用的Buffer组分相同。

基本反应条件

〈cDNA合成〉
灭菌蒸馏水Xμl
模板RNA
100-1000ng total RNA
10-100ng mRNA
Primer
1μl Oligo(dT)20 Primer
1μl Random Primer
10pmoles* Specific Primer
5×RT Buffer4μl
10mM dNTPs2μl
ReverTra Ace®1μl
RNase Inhibitor1μl

Total Volume20μl

几点建议

● PCR反应液的添加量

以Taq为基础的PCR酶以及KOD Dash的反应中最多可添加20%,KOD -Plus- 系列及KOD FX 系列的反应中最多可添加4%,推荐最好使用2%以下的逆转录反应液。


●模板RNA

Total RNA、mRNA、tRNA、rRNA等各种RNA都可以使用。各种情况下使用高纯度的样品时,可以得到较好的结果。


●对照体系

样品在第一次进行RT-PCR时,推荐同时进行对照实验。本试剂盒的对照用G3PDH引物,可适用于human、mouse、rat及swine的对照使用,PCR产物长度0.45kb。

FAQ请点击这里。

相关产品

●(单独销售的包装)

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Ace用 Buffer (5× RT Buffer) TRT-1B 1ml×1支 RMB 50 -20℃ -
dNTPs Mixture(10mM) NTP-301 各2umoles/0.2ml × 1支 RMB 200 -20℃ -
oligo(dT)20 FSK-201 1nmole × 1支 RMB 200 -20℃ -
Random Primer(9mer) FSK-301 2.5nmoles × 1支 RMB 200 -20℃ -

●高效率逆转录酶

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Ace TRT-101 10000U × 1支 RMB 800 -20℃ -

●高效率RT-PCR试剂盒

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Dash® PCR-401 100次份 RMB 2,200 -20℃ 产品说明书

●高保真性RT-PCR试剂盒

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra-Plus-™ PCR-501 100次份 RMB 2,390 -20℃ 产品说明书

●Realtime PCR用cDNA合成试剂盒(预混型逆转录试剂+基因组DNA去除试剂)

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover FSQ-301 200次份 × 1
(10μl反应体系)
RMB 2,800 -20℃ 产品说明书

●Realtime PCR用cDNA合成试剂盒(预混型逆转录试剂)

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix FSQ-201 200次份 × 1
(10μl反应体系)
RMB 2,000 -20℃ 产品说明书

●Realtime PCR用cDNA合成试剂盒

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
ReverTra Ace® qPCR RT Kit FSQ-101 200次份 × 1
(10μl反应体系)
RMB 1,500 -20℃ 产品说明书

●RNase Inhibitor

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
 RNase Inhibitor Recombinant type SIN-201 2500U × 1支 RMB 300 -20℃ -