增强Western Blot及ELISA等的检测信号,降低背景。

Western Blot・ELISA用免疫反应增强液 Can Get Signal® Immunoreaction Enhancer Solution

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价格表

Can Get Signal Solution 1 & 2

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
NKB-101T 各50ml RMB200 4℃ 产品说明书
NKB-101 各250ml RMB700 4℃ 产品说明书

Can Get Signal Solution 1

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
NKB-201 250ml RMB380 4℃ 产品说明书

Can Get Signal Solution 2

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
NKB-301 250ml RMB380 4℃ 产品说明书

用途

●Western BlotDot BlotELISA

说明

本试剂可作为一抗及二抗的反应液(稀释液)使用,具有提高Western Blot分析及ELISA灵敏度、特异性的功能。
本试剂由Solution1和Solution2组成,均可作为一抗及二抗的反应液使用。其溶液都经过最优化处理,故能抑制背景信号,可得到高信号的结果。 









 

特征

改善了灵敏度及特异性

在保持高特异性的基础上,对抗原抗体反应具有很强的促进效果,与以往的方法相比可得到高几倍到几十倍的信号特别是对反应性低的抗体的效果更为显著

广泛的适用性

可用于各种使用标记抗体的化学发光检测体系、化学显色检测体系以及荧光检测体系等

使用方便的Ready-to-use

已经按照使用浓度进行了配制,无须进行稀释

 

原理

实验例

1.通过Western Blot检测磷酸化蛋白质

向培养牛肾上腺髓质chromafin细胞培养液里添加任意浓度的胰岛素,进行5分钟刺激后,以细胞的裂解物为样品,通过Western Blot法检测磷酸化Akt及ERK蛋白质。结果可见,与以往方法(使用TBS-T)相比,使用Can Get Signal得到的信号明显增强而背景很低。




*数据由宫崎大学医学部药理学教研室的柳田俊彦老师提供。


2. 通过Western Blot检测EGFR 




通过Western Blot检测人的扁平上皮細胞(A431)中EGFR(Epidermal Growth Factor)的表达。以A431细胞的裂解液为样品,一抗反应用Can Get Signal® Solution 1[一抗:抗人EGFR抗体(mouse IgG1)],二抗反应用Solution 2
[二抗:抗小鼠IgG(Fab Specific, HRP标记)]进行检测。  



另外,作为对照,用TBS-T(以往方法)进行同样的实验。结果可见,用以往方法非特异性条带很浓,几乎无法检测出目的条带,而用Can Get Signal则非特异性条带显著减少,同时可确认到信号增强。


3.通过ELISA检测His-tag融合ERK2蛋白质  

使用无细胞蛋白质合成法合成的人来源的His-tag融合型MAP激酶(His-ERK2),通过三明治ELISA法(固相抗体:抗ERK2单克隆抗体、1抗:抗His-tag多克隆抗体、2抗:抗兔IgG-HRP抗体)进行检测。结果可见,通过在市售的封闭液中进行抗体反应的原方法,几乎得不到检测结果。而使用Can Get Signal,则无论在低浓度区域还是在高S/N比的条件下均可得到高灵敏度的检测结果。 







 

参考文献

1)N. Watanabe, et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 102(33):11663-8.(2005)
2)M. Katsuno, et al., Proc Natl Acad Sci U S A; 102(46):16801-6.(2005)
3)K. Shimono, et al., J Biol Chem.,280(47):39436-47.(2005)
4)Y. Matsuzono, et al., J Biol Chem., 281(1):36-42.(2006)
5)T. Hanada, et al., Autophagy. 2:110-118.(2006)
6)T.Sugano et al.,J.Neurochemistry.98:20(2006)


产品内容

【NKB-101T】
Solution 1 50ml×1瓶
Solution 2 50ml×1瓶

【NKB-101】
Solution 1 250ml×1瓶
Solution 2 250ml×1瓶

【NKB-201】
Solution 1 250ml×1瓶

【NKB-301】
Solution 2 250ml×1瓶 


备注

请另外准备Blocking试剂检测试剂。
本试剂不适用于Blocking
Blocking,推荐使用PVDF Blocking Reagent for Can Get Signal®
免疫组织染色・免疫细胞染色时,推荐使用Can Get Signal® immunostain

几点建议

关于本产品
本品最适用于Western Blot・ELISA等实验中「受体上的抗原」于抗体的反应。
化学发光、化学显色、荧光检测体系等均可使用。由对过氧化酶(peroxidase)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)等标记抗体的活性无影响的成分构成。
可与2抗后使用的增强灵敏度的系统一起使用。
可用于Western Blot・Dot Blot・ELISA等。


 ●生物素抗生物素抗体(Biotin・Avidin)反应
无促进效果。


 ●Blocking后的洗净
●1抗稀释液与Blocking液相同(或相近)的情况下可省略。
如不同则需要洗净。
详细可点击这里查阅。
来自用户的心声『只需Blocking的工夫即可得到漂亮的数据』,点击这里查看详细。

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