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| HOME > 最新产品信息 > 二恶英检测试剂盒 > Dio Quicker -For Gas and Ash- |
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目前，环境中的二恶英一般都是用高分辨率气相色谱和质谱(HRGC/HRMS)来检测的，这些 l 周期长，通常需要几周； l 成本高； l 由于上述原因，难以成为常规检测手段监控二恶英及类似物的产生； l 难以进行多样本检测，不适合土壤筛查。
为此，现已开发了一种较为简易的二恶英检测方法——用抗体进行ELISA检测。但是，传统的 本试剂盒采用竞争性酶免疫分析法，选用能识别与二恶英毒性当量(TEQ)相关性高的五氯二 用本试剂盒可简便且快速地测定环境样本中的二恶英量。另外，由于一次可进行多样本的检
注：二恶英毒性当量（Dioxin Toxicity Equivalency Quantity，TEQ）
1 快速的多样本检测 2 低成本 5 与HRGC/HRMS法的高相关性
试剂盒中所含的抗体是会与二恶英类异构体反应性强的单克隆抗体，[该类异构体共同决定 了环境样本中的二恶英毒性当量(TEQ)]，因此与仪器分析法（公认法）的相关性很高（废气 R2=0.98、飞灰R2=0.99、土壤R2=0.97），对排放物污染控制范围内的各种环境样本都能提 供可信的检测数据。 6 操作时的安全性
本试剂盒不用毒性很强的二恶英类物质作标准曲线，而改用氯酚衍生物，因此操作时比常规 的检测方法更安全。 7 检测结果的稳定性 8 保管试剂盒无需特别的设备 本试剂盒可贮存于冰箱中（2～8℃），使用及保管无需特别的设备。
1. 将待检测样本与抗二恶英单抗加入反应板，反应板上固化了抗原，4℃反应1小时。
2. 如果样本中二恶英含量很高，则单抗易与样本中的二恶英结合，而难以与反应板上固化的抗原
结合。 3. 因此，结合到反应板上的单抗越少，表明样本中二恶英的含量越高，反之，反应板上结合的单
抗越多，则表明二恶英的含量越低。 4. 将酶标二抗（辣根过氧化物酶，horseradish peroxidase，HRP）加入反应板，根据显色反应
后的颜色深浅对抗体进行定量，由此确定样本中二恶英的浓度。此时，用已知浓度的氯酚衍 生物作参照物得出标准曲线，再根据氯酚衍生物的量算出二恶英的浓度。然后，根据二恶英 毒性当量（TEQ）回归公式计算出样本的二恶英毒性当量。
本试剂盒包括室温保存品和冷藏保存品的两类组分，各装一盒，组成分别如下所示：
2．冷藏保存品（请在2-8℃保存）
※(7) 封口膜、(8)操作手册也可从试剂盒中取出，室温保存。
检测前需预先准备如下器材和物品
l 根据样本来源选择相应的试剂盒：
l 请根据操作手册配制本试剂盒的各种试剂。 l 请根据操作手册规定的时间进行每一步操作。 l 加不同试剂前请更换tip头。 l 本试剂盒的各种组分均为单独包装，每种组分均可单独使用。使用后请按照以下方法妥善
1. 试剂的配制 ※ 配制TCP溶液时，为防止TCP被吸附到容器壁上，推荐使用经过硅化处理的一次性离心 (2) 待检样本的配制 【例：样本作8次等比稀释】 ① 准备8支离心管，在第一管中加入80μl样本溶液，在剩下的七管中各加入DMSO 80μl。 注）含二恶英的样本溶液应收集到废液缸中，严格管理。 (3) 样本稀释用DMSO 直接使用。 (4) 一抗免疫反应用缓冲液 直接使用。 (5) 一抗溶液 (6) 二抗溶液的配制 用二抗稀释用缓冲液对二抗浓缩溶液作150倍稀释后再使用。分多次使用时，请按当次实验所 ※ (例) 在二抗稀释用缓冲液11.92ml中，添加二抗浓缩溶液80μl，混匀后再使用。 (7) 洗净液 取浓缩洗净液（10倍浓缩液）40ml，与360ml纯水混匀后使用※。 ※ 稀释后的洗净液请冷藏保存，并在1个月内使用完毕。 (8) 显色底物 直接使用※。 ※ 各批号之间可能会有颜色的差别，或结晶状沉淀物，但不会影响其性能。 (9) 反应终止液 直接使用※。 ※ 反应终止液为0.5mol/l硫酸，操作、废弃时请务必小心。 反应混合液的配制 将(a) 标准液或样本、(b) 一抗免疫反应用缓冲液、(c) 一抗溶液 按1：1：2的比例，如下(a)→(b)
2. 一抗反应 将上述配制好的混合溶液按100μl/孔加入到已冰浴冷却的反应板中，再用封口膜将反应板 ※ 反应温度升高时( 8℃以上)，灵敏度会降低。 3. 洗净 一抗反应结束后，弃去反应液，用洗净液将各孔洗四次，每次350μl/孔。洗完后，把反应板倒 4. 二抗反应 将二抗溶液按100μl/孔加入到洗净的反应板中。再用封口膜将反应板密封，室温（25℃左右） 二抗反应结束后，去除反应液，用洗净液将各孔洗六次，每次350μl/孔。洗完后，把反应板 5. 显色反应 在洗净的反应板中按照每孔100μl的量添加显色液，在室温（25℃左右）条件下反应30分钟 6. 测定吸光度 用柔软的吸水纸将反应板底部的水或其他污渍擦去，用酶标仪在450nm波长下测吸光度。 ※ 反应终止后，必须马上（15分钟内）测吸光度。 7. 定量 (1) 标准曲线的制作 以事先配制的各浓度的TCP标准液为样本，用试剂盒进行检测，再用酶标仪测定吸光度 y＝((A-D)/(1+(x/C)B))+D x：浓度(ng/ml) y：吸光度 A：0浓度的吸光度 B：曲线部分的斜度 C：50％阻碍（抑制）浓度(ng/ml) D：最小吸光度各系数 (2) 检测样本的定量 ①以零浓度（仅DMSO）样本的吸光度为100%，用已知浓度的TCP样本的测定值（吸光度）， ※(例) 零浓度的吸光度为2.00，TCP样本的吸光度为1.00时，阻碍（抑制）率为50%。 ②以阻碍（抑制）率为Y轴，TCP浓度为X轴，作成TCP标准曲线（如P11图）。 ③将测定二恶英样本时得到的吸光度除以零浓度的吸光度，计算出阻碍（抑制）率。再通过 ④将上述求得的TCP衍生物换算浓度代入到以下TEQ计算公式中，计算出二恶英毒性当量（TEQ）。 8. 二恶英毒性当量(TEQ)的计算方法 假定收集的废气量为A (m3N)，抽提后定量至a ml，作为样本粗提液。取该粗提液b ml，纯化 TEQ（ng-TEQ/ml）＝0.0669×〔TCP衍生物换算浓度（μg-TCP/ml）〕0.8301 (2)－For Ash－ 假定收集的飞灰量为B(g)，抽提后定量至a ml，作为样本粗提液。取该粗提液b ml，纯化后， TEQ（ng-TEQ/ml）＝0.0601×〔TCP衍生物换算浓度（μg-TCP/ml）〕0.9605 TEQ（ng-TEQ/g）＝TEQ（ng-TEQ/ml）×1×a/b×1/B
・n＝2测定的吸光度的偏差(C.V.值)在10%以下。
※关于前处理方法的说明[该方法是以日本仪器分析法（公认法为基础的方法）]
（1）首先将废气在滤纸中过滤，该滤纸便为“过滤废气后的滤纸”(A)。
（2）接着将过滤后的废气再在水中过滤，该水便为“水溶液”（B）。
（3）在水中过滤后的废气再在吸附剂中过滤，该吸附剂便为“过滤废气后的吸附剂”（C）。
（4）在吸附剂中过滤后的废气再在Diethylene glycol中过滤，便为“DEG”溶液（D）。
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简介 
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